1.測定前應將旋光儀及樣品置20℃ 士0.5℃ 的恒溫室中或規定溫度的恒溫室中，也可用恒溫水浴保持樣品室或樣品測試管恒溫lh以上，特別是一些對溫度影響大的旋光性物質，尤為重要。
2.未開電源以前，應檢查樣品室內有無異物，鈉光燈源開關是否在規定位置，示數開關是否在關的位置，儀器放置位置是否合適，鈉光燈啟輝後，儀器不要再搬動。
3. 開啟鈉光燈後，正常起輝時間至少20min，發光才能穩定，測定時鈉光燈盡量采用直流供電，使光亮穩定。如有極性開關，應經常於關機後改變極性，以延長鈉燈的使用壽命。
4.測定前，旋光儀調零時，必須重複按動複測開關，使檢偏鏡分別向左或向右偏離光學零位。通過觀察左右複測的停點，可以檢查儀器的重複性和穩定性。如誤差超過規定，儀器應維修後再使用。
5.將裝有蒸餾水或空白溶劑的測定管，放入樣品室，測定管中若混有氣泡，應先使氣泡浮於凸頸處，通光麵兩端的玻璃，應用軟布擦幹。測定時應盡量固定測定管放置的位置及方向，做好標記，以減少測定管及蓋玻片應力的誤差。
6.同一旋光性物質，用不同溶劑或在不同pH值測定時，由於締合、溶劑化和解離的情況不同，而使比旋度產生變化，甚至改變旋光方向，因此必須使用規定的溶劑。
7.渾濁或含有小顆粒的溶液不能測定，必須先將溶液離心或過濾，棄去初濾液測定。有些見光後旋光度改變很大的物質溶液，必須注意避光操作。有些放置時間對旋光度影響較大的，也必須在規定時間內測定讀數。
8.測定空白零點或測定供試液停點時，均應讀取讀數三次，取平均值。嚴格的測定，應在每次測定前，用空白溶劑校正零點，測定後，再用試劑核對零點有無變化，如發現零點變化很大，則應重新測定。
9.測定結束時，應將測定管洗淨晾幹放回原處。儀器應避免灰塵放置於幹燥處，樣品室內可放少許幹燥劑防潮
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